增强免疫比浊聚苯乙烯羧基胶乳投产

重庆博蓝鹰生物技术有限公司投产适合全自动化学发光免疫分析的亲水微米磁珠专利产品后，又建立聚苯乙烯微球设计和量产技术，成功制备适合增强免疫比浊的(白色)羧基胶乳，并进一步衍生成彩色羧基胶乳(免疫层析标记物)。此项目从2019年01月02日开始立项研发，到2020年05月27日开始试生产，经过多家用户测试以及对工艺优化，再到2022年01月19日实现试销售。

FlyW&Y羧基胶乳以苯乙烯为主单体，在所设计的特殊乳液反应体系经自由基聚合反应制备。所设计的乳液聚合体系，含设计合成的反应性羧基乳化剂(引入表面短链羧基)、设计合成的反应性磺酸乳化剂(引入表面磺酸)；在水相活化羧基时，磺酸基团不反应(维持阴离子状态)。胶乳表面羧基活化为活泼酯后，优化偶联抗体所用pH，通过胶乳表面磺酸负离子吸附多抗而促进多抗偶联，显著降低胶乳表面饱和偶联抗体时所需多抗用量。在优化储存条件下，羧基胶乳自身及其多抗偶联物基于表面静电排斥阻滞微球的自发凝聚，同时在应用体系优化pH 获得胶乳标记检测试剂对待测大分子抗原的强响应信号。

在胶乳表面生成带负电荷磺酸根及可活化羧基，胶乳活化后通过表面净负电荷吸引抗体而促进其与活化胶乳偶联、增强胶乳自身及偶联物的分散稳定性，是FlyW&Y羧基胶乳的设计思路；此设计思路借鉴于发光免疫用羧基磁珠表面官能团的设计。制备FlyW&Y羧基胶乳时所用两种特殊表面活性剂在表面引入特殊功能基团(图1)，所得胶乳用于偶联检测抗体时有特殊性能优势；用特制反应釜及优化工艺，获得粒径分布范围很窄的球形羧基胶乳(图2、图3)，实现批产近1.5 kg。用此羧基胶乳为原料，进一步制造了有望用于免疫层析的彩色胶乳。

 图1. 羧基胶乳微球官能团示意图          图2. 扫描电镜测100 nm胶乳形貌           图3.  100 nm胶乳DLS测粒径

量产的FlyW&Y羧基胶乳，粒径从85nm 到550 nm共5种，每种胶乳粒径分布均匀(PDI<7%)，电位滴定所得阴离子(羧基+磺酸)含量≥27 μmol/g胶乳，可活化羧基~0.1 μmol/g胶乳 (DMF中用DCC及NHS室温活化过夜的活泼酯量)。

经过多家客户测试反馈：羧基胶乳可胜任常用项目(图4和图5)且节约多抗，已实现20 g/批试销售；彩色胶乳还在意向客户测试中。